Práctica 1: Limpieza y esterilización del material de vidrio.

Objetivo → La realización de una limpieza correcta del material fungible con el fin de poder trabajar adecuadamente en sucesivos procesos de forma estéril.

Fundamento → Tras el uso del material de vidrio en el laboratorio necesitamos dejarlo en condiciones adecuadas de limpieza para poder trabajar al día siguiente, siguiendo los procedimientos de control adecuados. Para ello aplicamos desinfectantes para eliminar la presencia de microorganismos y la suciedad, posteriormente le aplicaremos una técnica de esterilizacíon por calor húmedo.

Reactivos:

• Agua destilada
• Solución jabonosa

Procedimiento de limpieza

1. Limpiar el material de vidrio cin agua jabonosa. Podemos usar agua fría, templada o caliente.
2. Para aplicar el agua jabonosa dispondremos de escobillones o estropajos con los que frotaremos el material por dentro y por fuera, intentando no dejar restos visibles.
3. Realizar varios aclarados con agua del grifo.
4. Aplicar el último aclarado con agua destilada.

Materiales para esterilización

• Escobillones y estropajos
• Bolsas de esterilización
• Control de esterilización 
• Autoclave
• Frascos lavadores

Preparación del material para esterilizar

1. Dejar escurrir o secar en la estufa, o secar a mano.
2. Una vez limpio el material lo introduciremos en bolsas especiales de autoclave.
3. Las bolsas se cortan de un tamaño algo mayor que el material a envolver para que nos permita sellarlo con la selladora.
4. Primero sellaremos un extremo, después introducimos el material y el testigo, y finalmente sellaremos el otro extremo.

Preparación del autoclave

1. Llenamos el depósito del autoclave con agua hasta la medida indicada (siempre pro debajo de la rejilla). Comprobar que la llave del agua está cerrada.
2. Poner el material sobre la rejilla (no demasiado apelmazado para que circule el vapor).
3. Cerrar la tapa de forma hermética.
4. Comprobar que está conectado a la corriente.
5. Colocar la temperatura y presión deseada, o marcar el programa que se desea colocar (1atm, 120ºC, 15 minutos). 
6. Iniciar el proceso.
7. Pasados unos minutos cerrar la llave de purga del aire.
8. Puede tardar unos 30 minutos en alcanzar la temperatura y presión deseada. Dejar actuar. Una vez que finalice no podrá abrirse hasta que la presión haya bajado a 0 atm y la temperatura esté por debajo de 50ºC.
9. Abrir la llave de vapor (no la del agua).
10. Dejar enfriar el material.
11. Colocar el material estéril en su sitio.

Actividades: 

1. ¿Por qué hay que cerrar la llave de paso de purga después de conectar y cerrar el autoclave? Para que a medida que se genere vapor, el aire que hay dentro del autoclave vaya saliendo por la llave de purga.
2. ¿Cuál es el motivo por el que hay que limpiar el material antes de esterilizarlo? Para eliminar los microorganismos más grandes.